Tecnologías

CENTRO NACIONAL DE SALUD PÚBLICA

Enfermedades Transmisibles

Zoonosis virales

1

Inmunofluorescencia Indirecta (IFI) para detección anticuerpos contra rabia

Una forma de la técnica de anticuerpos fluorescentes comúnmente utilizada para detectar anticuerpos séricos y complejos inmunes en tejidos y microorganismos en especímenes de pacientes con enfermedades infecciosas. La técnica implica la formación de un complejo antígeno-anticuerpo que está marcado con anticuerpo anti-inmunoglobulina conjugado con fluoresceína. (De Bennington, Diccionario de Saunders y Enciclopedia de Medicina y Tecnología de Laboratorio, 1984).
Fluorescent Antibody Technique, Indirect

Zoonosis Parasitaria

2

Aglutinación de látex para diagnóstico serológico de equinococosis quística Ensayos de aglutinación pasiva en los que el antígeno se adsorbe sobre partículas de látex que luego se aglutinan en presencia de un anticuerpo específico para el antígeno adsorbido. (De Stedman, 26ª edición, 1964). https://www.ncbi.nlm.nih.gov/mesh/?term=latex+agglutination+test

3

Técnica de ensayo inmunoenzimatico (ELISA) para diagnóstico de fasciolosis y cisticercosis humana

La técnica de ELISA emplea como antígeno líquido vesicular de cisticerco de Taenia solium, y los antígenos de la forma larvaria de Echinococcus granulosus y de la forma adulta de Fasciola hepatica, adheridos a soportes inertes (placa de microtitulación) y ligado a una anti gamaglobulina humana marcada con enzima, como detectora de la reacción antigeno-anticuerpo.
Manual de Procedimiento para el diagnosticos.

Zoonosis Bacteriana

4

ELISA para la detección de anticuerpos IgM de Leptospira     El método de ELISA es usado como una prueba de tamizaje que se complementa con la prueba de MAT, es un método para detectar anticuerpos IgM producto de una infección por leptospira; los anticuerpos se combinan con el antígeno de leptospira fijado a la superficie de los micropocillos de poliestireno. 

5

 • Prueba Inmunocromatografica para diagnóstico de peste
• Cultivo e identificación de Yersinia pestis (primaria)
• Elisa para detección de anticuerpos IgG para peste en humanos
 

6

• Prueba Rosa de Bengala, Prueba de Tubo y Prueba 2- Mercaptoetanol para diagnóstico de Brucelosis Prueba rosa de bengala (Card test o de la tarjeta): 
• Prueba in vitro, rápida y sencilla.
• Representa la prueba "screening" o tamizaje.
• Es una prueba de alta sensibilidad y especificidad debido a su pH ácido.
• Procedimiento cualitativo rápido de aglutinación macroscópica que se efectúa con una sola dilución y que detecta principalmente anticuerpos IgG 1.
• El colorante rosa bengala no ejerce ninguna acción en la actividad serológica y se puede reemplazar por otros colorantes de acridina. Su función es facilitar la observación de la reacción.
Prueba en tubo
• Prueba in vitro realizada en tubos.
• Es llamada también prueba lenta en tubos al necesitar 48 horas para la lectura de las reacciones de aglutinación.
• Método para corroborar los resultados de otras pruebas serológicas
• Detección de anticuerpo IgM e IgG2.
Prueba 2 – mercaptoetanol
• Prueba selectiva que detecta solamente la presencia de IgG 2.
• Se basa en que los anticuerpos IgM se degradan debido a la acción de ciertos compuestos que contienen el radical tiol, tales como el 2-mercaptoetanol. Las moléculas de IgG 2, en cambio, no sufren un efecto que altere su actividad para las reacciones aglutinantes.
• En el hombre esta prueba se debe incorporar en el diagnóstico de rutina.
• En los animales infectados los anticuerpos IgG persisten durante más tiempo y alcanzan título más alto que las IgM.
• La prueba 2-mercaptoetanol es útil para detectar infectados crónicos humanos o animales. 
Metaxénicas Bacterianas

7

Inmunofluorescencia Indirecta (IFI) para diagnóstico de Rickettsiosis         Una forma de la técnica de anticuerpos fluorescentes comúnmente utilizada para detectar anticuerpos séricos y complejos inmunes en tejidos y microorganismos en especímenes de pacientes con enfermedades infecciosas. La técnica implica la formación de un complejo antígeno-anticuerpo que está marcado con anticuerpo anti-inmunoglobulina conjugado con fluoresceína. (De Bennington, Diccionario de Saunders y Enciclopedia de Medicina y Tecnología de Laboratorio, 1984). https://www.ncbi.nlm.nih.gov/mesh/?term=indirect+immunofluorescence

8

Diagnostico Directo Enfermedad de Carrión          Diagnóstico directo: Tinción del frotis sanguíneo mediante el método de la coloración Giemsa. La coloración de Giemsa es una modificación de la coloración de Romanowsky, está disponible en cualquier laboratorio y nos permite detectar los glóbulos rojos infectados por Bartonella bacilliformis en sus formas bacilares, cocobacilares o cocoides. La muestra debe ser fijada con metanol antes del proceso de tinción. 

9

Cultivo y Caracterización Bacteriológica de Bartonella bacilliformis         

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Western Blot para el diagnóstico de la enfermedad de Carrión Identificación de proteínas o péptidos que se han separado por electroforesis mediante transferencia de transferencia desde el gel de electroforesis a tiras de papel de nitrocelulosa, seguido de marcado con sondas de anticuerpo. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/mesh/68015153
Metaxénicas Virales

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RT-PCR para Dengue, Chikungunya y ZIKA Reacción en Cadena de la Polimerasa Transcriptasa Inversa: Una variación de la técnica de PCR en la que se hace ADNc a partir de ARN mediante transcripción inversa. El cDNA resultante se amplifica a continuación usando protocolos de PCR estándar. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/mesh/?term=rt+pcr

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ELISA IgM Dengue, ELISA NS1 Dengue, ELISA IgM Chikungunya Ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas: Un inmunoensayo que utiliza un anticuerpo marcado con un marcador enzimático tal como peroxidasa de rábano picante. Aunque la enzima o el anticuerpo está unido a un sustrato inmunosorbente, ambos conservan su actividad biológica; El cambio en la actividad enzimática como resultado de la reacción enzima-anticuerpo-antígeno es proporcional a la concentración del antígeno y puede medirse espectrofotométricamente o a simple vista. Se han desarrollado muchas variaciones del método. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/mesh/?term=elisa

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ELISA IgM Fiebre Amarilla Ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas: Un inmunoensayo que utiliza un anticuerpo marcado con un marcador enzimático tal como peroxidasa de rábano picante. Aunque la enzima o el anticuerpo está unido a un sustrato inmunosorbente, ambos conservan su actividad biológica; El cambio en la actividad enzimática como resultado de la reacción enzima-anticuerpo-antígeno es proporcional a la concentración del antígeno y puede medirse espectrofotométricamente o a simple vista. Se han desarrollado muchas variaciones del método. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/mesh/?term=elisa
Leishmaniosis

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Método de Inmunofluorescencia Indirecta (IFI) para diagnóstico de Leishmaniosis Una forma de la técnica de anticuerpos fluorescentes comúnmente utilizada para detectar anticuerpos séricos y complejos inmunes en tejidos y microorganismos en especímenes de pacientes con enfermedades infecciosas. La técnica implica la formación de un complejo antígeno-anticuerpo que está marcado con anticuerpo anti-inmunoglobulina conjugado con fluoresceína. (De Bennington, Diccionario de Saunders y Enciclopedia de Medicina y Tecnología de Laboratorio, 1984). https://www.ncbi.nlm.nih.gov/mesh/?term=indirect+immunofluorescence

15

Método de Cultivo in vitro para Leishmaniasis  

1%

Método de IDRM para Leishmaniasis  
Chagas

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ELISA IgG Chagas/IFI IgG Chagas

La técnica ELISA emplea antígenos solubles de Tripanosoma cruzi, adheridos a soportes inertes (placa de microtitulación) y antiglobulinas humanas conjugadas con enzimas, como detectores de la reacción antígenoanticuerpo. Es un método de gran sensibilidad, pero cuya especialidad está sujeta a la calidad de los antígenos y reactivos empleados por lo que exigen una rigurosa estandarización. 
La técnica de inmunofluorescencia indirecta (IFI), emplea como antígeno epimastigotes de Trypanosoma, obtenidos de cultivo y fijados en láminas sobre las que se realiza la reacción antígeno-anticuerpo. La formación de este complejo es evidenciada por una antiglobulina humana marcada con fluoresceína.

Manual de Procedimientos de Laboratorio para el Diagnóstico de la Trypanosomiosis Americana (Enfermedad de Chagas)

 

Malaria

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Densitometría parasitaria para la evaluación de la resistencia del plasmodium a los medicamentos antimaláricos. Reporte cuantitativo en parásitos por micro litro de sangre.  
Entomología

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Identificación taxonómica de los vectores de malaria, dengue, fiebre amarilla selvática, leishmaniosis, bartonelosis, enfermedad de Chagas y peste Se enfatiza en las técnicas de colecta, conservación, transporte de especímenes y técnicas de montaje, para no deteriorar las muestras y proceder a su identificación taxonómica; además, se incluyen los criterios para incriminar al hombre como vectores de patógenos. http://www.bvs.ins.gob.pe/insprint/salud_publica/nor_tec/36.pdf
Hepatitis y Enterovirus

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Método Enzima inmunoanálisis (ELISA) Directo para la Detección de Antígeno de superficie de Hepatitis B-HBsAg ELISA competitivo para la Detección de Anticuerpos totales contra el Antígeno Core la Hepatitis Viral B. Ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas: Un inmunoensayo que utiliza un anticuerpo marcado con un marcador enzimático tal como peroxidasa de rábano picante. Aunque la enzima o el anticuerpo está unido a un sustrato inmunosorbente, ambos conservan su actividad biológica; El cambio en la actividad enzimática como resultado de la reacción enzima-anticuerpo-antígeno es proporcional a la concentración del antígeno y puede medirse espectrofotométricamente o a simple vista. Se han desarrollado muchas variaciones del método. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/mesh/?term=elisa

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Método Enzima inmunoanálisis (ELISA) Directo para la Detección de Antígeno de Rotavirus Ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas: Un inmunoensayo que utiliza un anticuerpo marcado con un marcador enzimático tal como peroxidasa de rábano picante. Aunque la enzima o el anticuerpo está unido a un sustrato inmunosorbente, ambos conservan su actividad biológica; El cambio en la actividad enzimática como resultado de la reacción enzima-anticuerpo-antígeno es proporcional a la concentración del antígeno y puede medirse espectrofotométricamente o a simple vista. Se han desarrollado muchas variaciones del método. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/mesh/?term=elisa
Virus Respiratorio

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Inmunofluorescencia Directa (IFD) para diagnóstico de virus respiratorios Una forma de técnica de anticuerpo fluorescente que utiliza un fluorocromo conjugado con un anticuerpo, que se añade directamente a una suspensión de tejido o de células para la detección de un antígeno específico. (Bennington, Diccionario de Saunders y Enciclopedia de Medicina y Tecnología de Laboratorio, 1984). https://www.ncbi.nlm.nih.gov/mesh/?term=direct+immunofluorescence

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PCR tiempo real para el diagnóstico de virus influenza A y B Reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real: Métodos utilizados para detectar los productos de ADN amplificados de la reacción en cadena de la polimerasa a medida que se acumulan en lugar de al final de la reacción. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/mesh/?term=real+time+pcr
BTS

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Método: Inmunofluorescencia FTA - ABS (SIFILIS) La prueba de FTA-Abs (Fluorescent Treponemal Antibody-Absorption Test), es una prueba de inmunofluorescencia indirecta, en la que el suero problema, es diluido en una solución absorbente (extracto de cultivo de Treponema phagedenis), y colocado en una lámina que contiene el antígeno (Treponema pallidum cepa Nichols). Si en el suero se encuentran anticuerpos contra Treponemas patógenos, éstos se unirán al antígeno y cuando se adiciona el conjugado (inmunoglobulina antihumana con isotiocianato de fluoresceína) éste se unirá al anticuerpo dando como resultado una reacción que se visualiza en el microscopio de fluorescencia. http://www.bvs.ins.gob.pe/insprint/salud_publica/nor_tec/17.pdf

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Identificación de Neisseria gonorrhoeae por utilización de carbohidratos en base CTA Se realiza a partir de las colonias con identificación presuntiva. mediante la prueba de utilización de carhohidratos esterilizados por filtración, determinándose la producción de acidez a partir de glucosa (GLU), y sin variación a partir de lactosa (LAC), maltosa (MAL) y sacarosa (SUC) a la concentración de 1 a 2%, contenidos en base cystina tripticase agar. http://www.bvs.ins.gob.pe/insprint/salud_publica/nor_tec/19.pdf
VIH

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Recuento de linfocitos CD/4, CD/8, CD/3 por citometría de flujo en pacientes VIH positivos Citometría de flujo: Técnica que utiliza un sistema de instrumentos para hacer, procesar y visualizar una o más mediciones en células individuales obtenidas de una suspensión de células. Las células se tiñen habitualmente con uno o más colorantes fluorescentes específicos de los componentes celulares de interés, por ejemplo, el ADN y la fluorescencia de cada célula se mide a medida que atraviesa rápidamente el haz de excitación (láser o lámpara de arco de mercurio). La fluorescencia proporciona una medida cuantitativa de varias propiedades bioquímicas y biofísicas de la célula, así como una base para la clasificación celular. Otros parámetros ópticos medibles incluyen la absorción de la luz y la dispersión de la luz, siendo la última aplicable a la medición del tamaño, forma, densidad, granularidad y captación de las células. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/mesh/?term=cytometry%2C+flow

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Inmunofluorescencia Indirecta para VIH-1 Si en el suero del paciente existen anticuerpos VIH, estos se unirán al antígeno viral que está en las células adheridas al portaobjeto. Este complejo es detectado mediante la adición de antiinmunoglobulina humana conjugada con fluoresceína, siendo esta reacción observada mediante microscopio de fluorescencia. http://www.bvs.ins.gob.pe/insprint/salud_publica/nor_tec/29.pdf
Micobacterias

28

Cultivo y susceptibilidad por BACTEC MGIT 960  

29

Prueba molecular para diagnóstico de TBMDR Genotype MTBDRPLUS  

30

Microscopia por fluorescencia Microscopía de especímenes teñidos con colorante fluorescente (generalmente isotiocianato de fluoresceína) o de materiales fluorescentes naturales, que emiten luz cuando se exponen a luz ultravioleta o azul. La microscopía de inmunofluorescencia utiliza anticuerpos que están marcados con colorante fluorescente. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/mesh/68008856
Micología

31

Determinación de la susceptibilidad in vitro a los anti fúngicos.  

32

Determinación de esporas fúngicas en UFC/m 3 en ambiente interno  

33

Paquete tecnológico: Cultivo y Tipificación de Sporothrix Schenkii  

34

Inmunodifusion en el gel agar para Dx. Micosis profunda Técnica que implica la difusión del antígeno o anticuerpo a través de un medio semisólido, generalmente agar o gel de agarosa, con el resultado de ser una reacción de precipitina. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/mesh/?term=immunodiffusion
Enteroparásitos

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-Método de Concentración por Sedimentación en tubo(TSET)
-Método de Kato katz
-Método de cultivo Harada Mori
-Método de Sedimención Rápida 
-Método de Graham

MÉTODO DE CONCENTRACIÓN POR SEDIMENTACIÓN EN TUBO(TSET):  Se basa en la gravidez que presentan todas las formas parasitarias para sedimentar espontáneamente en un medio menos denso y adecuado como la solución fisiológica. En este método es posible la detección de quistes, trofozoítos de protozoarios, huevos y larvas de helmintos.
MÉTODO DE KATO KATZ: Se basa en la técnica de Kato y que permite cuantificar la presencia de huevos de helmintos. Se expresa en número de huevos por gramo de heces (hpg). Técnica Kato: Método que consiste en la diafanización o aclaración de las heces con el uso de glicerina, que permite preparar una capa transparente y observar las formas parasitarias.
MÉTODO DE CULTIVO HARADA MORI:   Técnica que permite el desarrollo de huevos a estadios larvales de los nemátodes permitiendo su diferenciación morfológica. Es útil, principalmente, para la obtención de larvas rabditiformes y filariformes de anquilostomídeos y estrongiloideos.                    
MÉTODO DE SEDIMENTACIÓN RÁPIDA: Se basa en la gravidez de los huevos que, por su tamaño y peso sedimentan rápidamente cuando se suspenden en agua.                                  
MÉTODO DE GRAHAM MÉTODO DE GRAHAM: La hembra de Enterobius vermicularis deposita sus huevos en las márgenes del ano durante la noche. La técnica de Graham tiene por objeto adherir estos huevos a la cinta adhesiva transparente o cinta “scotch”, la que se extenderá posteriormente en una lámina portaobjeto para su observación microscópica. http://www.bvs.ins.gob.pe/insprint/salud_publica/nor_tec/37.pdf
Enteropatógenos

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Aislamiento y tipificación de bacterias entero patógenas  

Enfermedades no transmisibles

Intrahospitalaria

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Susceptibilidad antimicrobiana por disco difusión                                                El método Kirby-Bauer (método de difusión en agar) es empleado para determinar la sensibilidad de un agente microbiano frente a un antibiótico. Este método comprende lo que se denomina un antibiograma o prueba de susceptibilidad bacteriana frente a drogas específicas. 

CENTRO NACIONAL DE ALIMENTACIÓN Y NUTRICIÓN

38 Tecnología para la promoción de la alimentación del niño de 6 a 23 meses  
39 Tecnología de Decisiones Informadas Herramienta para la gestión social que contribuye a priorizar acciones para reducir la desnutrición infantil sobre la base de información local. 
40 Determinación Cuantitativa de Yodo en Sal La evaluación cualitativa de yodo en sal se realizó utilizando el reactivo de yoditest para ello, se pidió una muestra de sal que se emplea para preparar los alimentos en el hogar y se agregó yoditest, seguidamente se observó el color resultante de la reacción y se comparó con la escala de colores para registrar la puntuación correspondiente en partes por millón -ppm- (0; 7; 15 y >30 ppm). Se consideró como adecuado nivel de yodo para consumo cuando se encontró valores >15 ppm. 

CENTRO NACIONAL DE SALUD OCUPACIONAL Y PROTECCIÓN DEL AMBIENTE PARA LA SALUD

41 Determinación de la actividad colinesterasa en suero  
42 Determinación de la actividad colinesterasa erotricitaria  

CENTRO NACIONAL DE CONTROL DE CALIDAD

43 Pruebas Rápidas para el Control de Calidad de Medicamentos